第三代定序的 PacBio HiFi Reads,兼具有更長讀長且不失高精準度的特性,即使是複雜的基因組,也能快速、經濟地進行基因組定序以及組裝。這項突破性技術除了可大幅提升基因組組裝的完整性,並可精準檢測基因變異與甲基化修飾。這些優勢對於無參考序列的非模式物種以及特殊品系的模式物種,可以提供後續功能基因組學、育種或是物種起源等更深入的研究。

自組織萃取 DNA 後,先將樣品 DNA 片段化至最適定序長度 (7~25kb),接著製成啞鈴狀模板 (SMRTbell) 文庫,並於 PacBio Revio 平台進行定序與後續分析。
| DNA 檢體需求 | |
|---|---|
| 樣品型態 | DNA |
| 總量 | ≧ 10000 ng |
| 濃度 (Qubit) | ≧ 150 ng/ul |
| Qubit/Nanodrop ratio | 0.7~1.3 |
| 純度 | OD260/OD280 ≧ 1.7;OD260/OD230 ≧ 1.5 |
| 體積 | ≧ 70 ul |
| DNA 品質 | GQN10kb > 7.0 ; GQN30kb > 5.0 (Fragment Analyzer system) |
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